鞘流階梯乳化數字液滴 PCR 技術
一種基于單層光刻技術的鞘流階梯乳化(CFSE)器件,用于生成高密度液滴陣列,實現片上多重熒光數字PCR。 該技術的主要優勢有兩點:一是基于單層光刻工藝實現了傳統上雙層光刻工藝才能解決的階梯乳化液滴生成功能;二是無需提取油相,液滴生成后,存儲腔中內相流體(PCR反應體系)的體積占比可高達72%,為構建高密度的液滴陣列、保留后續檢測單元集成的預留空間提供了解決方案。 此外,該器件在重復性、穩定性、檢測精確性等方面也表現出了優異性能。
鞘流階梯乳化數字液滴 PCR 相關案例:
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一種可重復使用的微流體芯片,該芯片基于階梯乳化(Step Emulsification)產生納升液滴陣列,用于同時對8個樣品進行片上多重熒光數字PCR。 裝置包含兩塊玻璃板,可實現預先填充礦物油的快速組裝。 通過由單個壓力泵同時驅動8個樣品通道的階梯乳化,利用噴嘴陣列快速產生液滴,生成的液滴在U形腔室中可自組裝成單層液滴陣列,每個腔室可容納約10000個0.35 nL體積的微滴。 系統采用的油相配方有效避免和消除了數字PCR溫控過程中氣泡的產生,在熱循環期間不需要采用過壓控制。 團隊將該芯片應用于臨床樣本HER2拷貝數變異的定量評估,驗證了多重數字PCR性能。
參考文獻:
[1]A reusable microfluidic device for generating droplet arrays for digital PCR based on step emulsification.
[2]Development and Application of Digital PCR Technology.
[3]Easy-to-Operate Co-flow Step Emulsification Device for Droplet Digital Polymerase Chain Reaction.
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