亚洲国产成人精品片在线观看,国产视频h,h欧美在线

重組蛋白A瓊脂糖凝膠FF

【編號】BK-NRPB01L

【CAS號】CAS

【貨號】BK-NRPB01L-100

【規格】

5分鐘輕松選對產品方案

17715390137 / 18101240246 / 18914047343

價格：登錄查看

數量：

品名： 重組蛋白A 瓊脂糖凝膠FF

英文名： Recombinant Protein A NUPharose Fast Flow, rProtein A NUPharose FF

規格： 20 ml，100 ml，1 L，1 ml預裝柱，5 ml預裝柱，特殊規格訂制

運輸： 2 ~ 25℃，常壓、避光

貯存： 20%乙醇，2 ~ 8℃

保質期： 3 年

相關介紹：

蛋白A是一種金黃色葡萄球菌細胞壁蛋白質，包含有5個區域，可以同IgG的Fc片段結合。作為一個親和配基，蛋白A能夠比較緊密地偶聯到NUPharose上，使得這些區域可以同游離的IgG自由結合。一分子的蛋白A可以結合兩分子的IgG。

技術指標：

基質	4%高度交聯瓊脂糖凝膠
配基	重組蛋白A
配基密度	≥ 6 mg/ml
填料粒徑	60 ~ 180 μm
最大流速	800 cm/h
推薦流速	20 ~ 100 cm/h
pH穩定性	pH 3 ~ 9
耐反壓	0.3 MPa
載量	≥40 mg/ml IgG

抗體與蛋白A、蛋白G的結合力：

種類

Species

亞型

Antibody Class

蛋白A

Protein A

蛋白G

Protein G

人

Human

IgG₁

IgG₂

IgG₃

IgG₄

IgM

IgD

IgA

Fab

+++

小鼠

Mouse

IgG₁

IgG_2a

IgG_2b

IgG₃

IgM

+++

大鼠

Rat

IgG₁

IgG_2a

IgG_2b

IgG_2c

+++

牛

Cow

IgG₁

IgG₂

+++

山羊

Goat

IgG₁

IgG₂

+++

馬

Horse

IgG_(ab)

IgG_(c)

IgG_(T)

+++

兔Rabbit

IgG

+++

豬Pig

IgG

+++

狗Dog

IgG

+++

雞Chicken

IgY

注：-表示不結合；+表示微弱結合；++表示中等結合；+++表示很強結合。

應用舉例：

結合緩沖液：20 mM磷酸緩沖液，150 mM NaCl，pH 7.4

洗脫緩沖液：0.1 M檸檬酸緩沖液，pH 4.0

中和緩沖液：1 M Tris ~ HCl，pH 9.0

1)1 ml重組蛋白A瓊脂糖凝膠預填柱用5 ~ 10個柱床體積的蒸餾水洗去保存液；

2)用結合緩沖液結合緩沖液平衡 5 ~ 10個柱床體積；

3)將5 ml兔多抗血清用結合緩沖液稀釋到50 ml，0.45 μm濾膜過濾上樣；

4)用結合緩沖液再洗 5 ~ 10個柱床體積；

5)用洗脫緩沖液洗脫抗體，收集洗脫峰，并用中和緩沖液調節其pH至中性；

6)每次使用后用3 ~ 5個柱床體積的0.1 M 檸檬酸緩沖液（pH 3.0）再生清洗；

7)SDS-PAGE（圖1）電泳分析洗脫下來的兔多抗純度在95%以上。

圖 1

注意事項：

1)預填柱使用簡易方便，在沒有儀器設備的條件下也可以完成純化任務。

2)樣品洗脫后一般pH很低，應立即用堿性中和緩沖液（如1 M Tris-HCl，pH 9.0）將收集到的抗體溶液中和到中性，或在收集容器中事先裝5% ~ 20%、pH 7 ~ 9的緩沖液（如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸緩沖液），以利于維持抗體的生物活性，避免抗體失活。

3)使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致，避免柱床內產生氣泡，影響純化效果，如果已經產生氣泡，可以自行重裝柱子。

4)通常（每次）目標樣品洗脫后應繼續用0.1 M檸檬酸緩沖液（pH 2 ~ 3）洗3 ~ 5個柱體積，然后用平衡緩沖液清洗5個柱體積以上，作簡易再生。

5)使用數次后應進行在位清洗，建議用0.1% Triton X-100 37℃洗1 ~ 3個柱體積（10 ~ 30 min），立即用平衡緩沖液清洗5個柱體積以上；或70%乙醇洗5個柱體積以上（可保持4 ~ 16 h），再用平衡緩沖液清洗5柱體積以上。在位清洗能去除強疏水性蛋白質和脂類，恢復柱子的載量和流速。