鏈霉親和素瓊脂糖凝膠FF重力預裝柱
| 【編號】BK-NRPB41S | 【CAS號】CAS | ||
| 【貨號】BK-NRPB41S-Z25 | 【規格】 | ||
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| 價格： 登錄查看 | |||
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品 名：鏈霉親和素瓊脂糖凝膠FF
英文名：Streptavidin NUPharose Fast Flow, Streptavidin NUPharose FF
規 格：20 ml，100 ml，1L，1 ml預裝柱，5 ml預裝柱，特殊規格訂制
運 輸：2 ~ 25℃，常壓、避光
貯 存：20%乙醇，2 ~ 8℃
保質期：3年
相關介紹：
鏈霉親和素瓊脂糖凝膠FF是一種將鏈霉親和素（Streptavidin）鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質。該產品保留了瓊脂糖極好的親水性及大網架結構，與生物活性大分子有很好的相容性，具有載量高，非特異性吸附少，流速快等特點。
鏈霉親和素瓊脂糖凝膠FF是基于鏈霉親和素與生物素的特異性結合實現從生物樣品或混合物中分離純化生物素或生物素化的抗原、抗體、核酸等物質。由于鏈霉親和素與生物素的結合力非常強，一般需要變性條件下才能將其分離，這容易導致樣品或配基失活。這個特性可用于抗原與抗體的分離，如將生物素化的抗體結合在凝膠上，然后利用抗原抗體的親和特性純化無生物素化的抗原，抗原洗脫時抗體不會被洗脫。反之亦可。
另外，鏈霉親和素與2-亞氨基生物素（2-iminobiotin）的結合相對生物素較弱，在pH 9.5 ~ 11.0時容易結合，pH 4.0時不需要變性劑即可洗脫，一般不影響樣品的活性和凝膠的活性。
技術指標：
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基質 |
4%瓊脂糖凝膠微球 |
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配基 |
鏈霉親和素 |
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配基密度 |
~5 mg/ml |
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填料粒徑 |
60 ~ 180 μm |
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最大流速 |
800 cm/h |
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推薦流速 |
15 ~ 100 cm/h |
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pH穩定性 |
短時間pH 2 ~ 11；長時間pH 4 ~ 9 |
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耐反壓 |
0.3 MPa |
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載量 |
≥300 nmol/ml生物素 ≥6 mg/ml生物素化蛋白 |
使用方法：
1 推薦緩沖液
1.1 純化生物素或生物素化物質
結合緩沖液：20 mM NaH2PO4, 150 mM NaCl， pH 7.4
洗脫緩沖液：8 M 鹽酸胍，pH 1.5
1.2 純化2-亞氨基生物素或2-亞氨基生物素標記的物質
結合緩沖液：50 mM 碳酸銨，500 mM NaCl，pH 10.0
洗脫緩沖液：50 mM 乙酸銨，500 mM NaCl，pH 4.0
1.3 純化抗原或抗體
結合緩沖液：20 mM NaH2PO4，150 mM NaCl，pH 7.4
洗脫緩沖液：100 mM 甘氨酸-鹽酸，pH 3.0
注：用于生物素化的抗體純化未生物素化的抗原（或生物素化的抗原純化未生物素化的抗體）有2種方法，①可先在游離狀態下抗原與抗體結合，然后當樣品純化即可；②也可以將生物素化的抗體（或抗原）先結合柱上，然后對應的未生物素化的抗原（或抗體）當樣品純化。
2 樣品準備
上柱的樣品應盡量保持與結合緩沖液一致。通常可用透析、超濾、稀釋等方法處理樣品。并且上柱前應過0.45 μm濾膜或高速離心去除不溶物。
3 樣品純化
3.1 取適量的鏈霉親和素瓊脂糖凝膠FF裝入合適的層析柱中，用結合緩沖液平衡5個柱體積，建議流速為100 cm/h。
3.2 將準備好的樣品緩慢上柱，為保證樣品與鏈霉親和素充分結合，應控制好上樣流速，建議流速為15 ~ 50 cm/h。
3.3 上樣后用結合緩沖液平衡10個柱體積以上，或平衡至基線，洗去雜質，推薦流速為100 cm/h。
3.4 用洗脫緩沖液洗10 ~ 20個柱體積，建議流速為100 cm/h，收集的洗脫液應立即調節pH至穩定范圍，并根據需要置換緩沖液。
3.5 洗脫目的蛋白后的柱子應立即用中性的結合緩沖液平衡，并用20%乙醇保存柱子，或進行下一次純化。
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