水凝膠：光固化透明質(zhì)酸（BKNM-HAMA）
| 【編號(hào)】BK2020121706 | 【CAS號(hào)】cas | ||
| 【貨號(hào)】BK2020121706-02 | 【規(guī)格】 | ||
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| 價(jià)格： 登錄查看 | |||
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產(chǎn)品組分
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組分 |
性狀 |
存儲(chǔ)條件 |
規(guī)格 |
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A: HAMA |
白色海綿狀 |
-20℃，避光 |
0.2 or 0.5 g/瓶 |
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B:光引發(fā)劑 LAP |
白色粉末狀 |
室溫，避光 |
0.025 g/瓶 |
干態(tài):-20℃避光，6個(gè)月，可常溫運(yùn)輸。溶液∶4℃避光,7天; -20C避光，3個(gè)月;溶液反復(fù)凍融會(huì)影響產(chǎn)品性能，盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
有效日期
生產(chǎn)日期見包裝。
1配制0.25%(w/v)引發(fā)劑標(biāo)準(zhǔn)溶液
(1)取10 mL PBS，加入裝有引發(fā)劑LAP的棕色瓶中{(內(nèi)含0.025g LAP);2)以40-50°℃水浴加熱溶解15分鐘，期間振蕩數(shù)次;
該LAP標(biāo)準(zhǔn)液在4℃避光條件下可保存12個(gè)月。⒉配制HAMA溶液
(建議HAMA-1CK濃度為2-10 %(W/),HAMA-40OK濃度為1-3%(w/))(1）取所需質(zhì)量的HAMA放入離心管;
(2)取所需體積引發(fā)劑標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到上述離心管中;
(3)于25-50 ℃溶解1-2 h,期間不斷攪拌/振蕩;(HAMA黏度較大，溶解時(shí)問較長)(4)將HAMA溶液使用0.22um無菌針頭過濾器滅菌。
二維細(xì)胞培養(yǎng)建議
將HAMA溶液于37℃水浴避光保溫備用(防止低溫凝膠化);立即將HAMA溶液注入孔板;
(96孔板:50~100uL/孔.48孔板: 100-3CQuL/孔. 24孔板: 300-500iL/孔)以405nm光源，輻照10-30秒使凝膠化, 可通過光照時(shí)問及強(qiáng)度調(diào)控凝膠強(qiáng)度;將培養(yǎng)基加入孔中覆蓋凝膠，置于37℃培養(yǎng)箱中5分鐘,清洗樣品，吸去培養(yǎng)基;將細(xì)胞懸浮液加入到孔板中即可。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行培養(yǎng)基更換、觀察拍照等操作
(操作程序無特殊要求)。
三維細(xì)胞培養(yǎng)建議
收集細(xì)胞并用37℃預(yù)熱的HAMA溶液重懸，配制細(xì)胞懸液;向孔板中加入細(xì)胞懸液;
(96 孔板:50-100uL/孔，48孔板:100~300L/孔，24孔板:300-500uL/L)以405nm光源，照射10-30秒使凝膠化,可通過光照時(shí)間及強(qiáng)度調(diào)控凝膠強(qiáng)度;提示:加入一孔固化一孔，防止細(xì)胞沉淀
>向各孔加入培養(yǎng)基，于37℃培養(yǎng)箱中5分鐘，清洗樣品，移去培養(yǎng)基;
加入新鮮培養(yǎng)基并長期培養(yǎng)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行培養(yǎng)基更換、觀察拍照、免疫熒光染色等操作〈操作程序無特殊要求)。
溫馨提示:請勿直視固化光源。
甲基丙烯酰化明膠（GelMA）由于具有生物兼容性好、可見光固化的特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞3D培養(yǎng)、組織工程、生物3D打印等研究領(lǐng)域，已有上萬篇學(xué)術(shù)論文中采用了GelMA水凝膠。團(tuán)隊(duì)研制的GelMA產(chǎn)品具有批次穩(wěn)定、服務(wù)專業(yè)等優(yōu)點(diǎn)，自推出以來，已服務(wù)哈佛、劍橋、麻省理工、港大、清華、北大、浙大、上交等國內(nèi)外高校的數(shù)百個(gè)課題組。
1 理化性能
圖1 (a)三種型號(hào)GelMA核磁普；(b)GelMA（GM-90）光固化過程流變分析
圖2 三種型號(hào)GelMA水溶液的降溫sol-gel轉(zhuǎn)變過程，GelMA濃度分別為5 % (a)和10 % (b)；及升溫gel-sol轉(zhuǎn)變過程，GelMA 濃度分別為5 % (c)和10 % (d)
圖3 三種型號(hào)GelMA的力學(xué)測試：(a) 壓縮曲線；(b) 流變曲線（GelMA濃度為10 % w/v）
2 生物相容性
GelMA已廣泛用于干細(xì)胞、癌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等各類細(xì)胞的培養(yǎng)，細(xì)胞存活率大于90%，細(xì)胞功能化良好。
圖4 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSC）在GelMA表面及內(nèi)部培養(yǎng)效果
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